Aplikácia chromogénnej techniky na test bakteriálnych endotoxínov

Chromogénna technika patrí medzi tri techniky, ktoré tiež obsahujú techniku ​​gélovej zrazeniny a turbidimetrickú techniku ​​na detekciu alebo kvantifikáciu endotoxínov z gramnegatívnych baktérií pomocou amoebocytového lyzátu extrahovaného z modrej krvi krabov podkovovitých (Limulus polyphemus alebo Tachypleus tridentatus).Môže byť klasifikovaný ako koncový-chromogénny test alebo kineticko-chromogénny test na základe konkrétneho použitého princípu testu.

Princíp reakcie spočíva v tom, že: lyzát amebocytov obsahuje kaskádu serínových proteázových enzýmov (proenzýmov), ktoré môžu byť aktivované bakteriálnymi endotoxínmi.Endotoxíny aktivujú proenzýmy na produkciu aktivovaných enzýmov (nazývaných koaguláza), koaguláza katalyzuje štiepenie bezfarebného substrátu a uvoľňuje žltý produkt pNA.Uvoľnený pNA sa môže merať fotometricky pri 405 nm.A absorbancia pozitívne koreluje s koncentráciou endotoxínu, potom môže byť koncentrácia endotoxínu zodpovedajúcim spôsobom kvantifikovaná.


Čas odoslania: 29. septembra 2019