Čo je endotoxínový test?

Čo je endotoxínový test?

Endotoxíny sú hydrofóbne molekuly, ktoré sú súčasťou lipopolysacharidového komplexu, ktorý tvorí väčšinu vonkajšej membrány gramnegatívnych baktérií.Uvoľňujú sa, keď baktérie odumrú a ich vonkajšie membrány sa rozpadnú.Endotoxíny sa považujú za hlavných prispievateľov k pyrogénnej reakcii.A parenterálne produkty kontaminované pyrogénmi môžu u ľudí viesť k rozvoju horúčky, indukcii zápalovej reakcie, šoku, zlyhaniu orgánov a smrti.

Endotoxínový test je test na detekciu alebo kvantifikáciu endotoxínov z gramnegatívnych baktérií.

Králiky sa najprv používajú na detekciu a kvantifikáciu endotoxínov vo farmaceutických produktoch.Podľa USP RPT zahŕňa sledovanie zvýšenia teploty alebo horúčky po intravenóznej injekcii liečiva králikom.A 21 CFR 610.13(b) vyžaduje test na pyrogén na králikoch pre špecifikované biologické produkty.

V 60-tych rokoch Fredrick Bang a Jack Levin zistili, že amebocyty kraba podkovy sa budú zrážať v prítomnosti endotoxínov.TheLimulus ambocytový lyzát(alebo Tachypleus Amebocyte Lysate) bol vyvinutý podľa toho, aby nahradil väčšinu RPT.Na USP sa test LAL označuje ako test bakteriálneho endotoxínu (BET).A BET by sa mohlo uskutočniť pomocou 3 techník: 1) techniky gélovej zrazeniny;2) turbidimetrická technika;3) chromogénna technika.Požiadavky na test LAL zahŕňajú optimálne pH, iónovú silu, teplotu a čas inkubácie.

V porovnaní s RPT je BET rýchly a efektívny.BET však nedokázala úplne nahradiť RPT.Pretože test LAL môže byť ovplyvnený faktormi a nie je schopný detegovať neendotoxínové pyrogény.